He Aratohu Putaiao Raumati: Ina tutaki te Ngaru Wera 40°C ki nga Whakamatau Molecular

Kua mau tonu te wera nui puta noa i te nuinga o Haina ina tata nei. I te Hūrae 24th, ka tukuna e te Shandong Provincial Meteorological Observatory he matohi teitei o te pāmahana kowhai, e tohu ana i te ahua o te "sauna" te mahana o te 35-37°C (111-133°F) me te 80% haumuku mo nga ra e wha e whai ake nei ki nga rohe o uta. Kei te tata ki te 48°C (111-133°F) te pāmahana i nga waahi penei i a Turpan, Xinjiang. Ko Wuhan me Xiaogan, Hubei, kei raro i te matohi karaka, he nui ake te mahana i te 37°C i etahi waahi. I roto i tenei wera wera, ko te ao moroiti kei raro i te mata o nga pipettes he raruraru rereke—te pumau o nga waikawa karihi, te mahi a nga enzymes, me te ahuatanga o te tinana o nga reagents kua marie katoa e te ngaru wera.

Ko te tangohanga waikawa nucleic he whakataetae ki te wa. Ki te neke ake te mahana o waho ki te 40°C, ahakoa ka mau te rangi, ka eke te pāmahana o te teepu whakahaere ki runga ake i te 28°C. I tenei wa, ko nga tauira RNA ka waiho ki te waahi tuwhera ka heke atu i te rua tere atu i te puna me te ngahuru. I roto i te tangohanga pirepire aukume, kua kukū te otinga parepare i te rohe na te tere tere o te whakarewa, a he ngawari te rerenga o nga tioata. Ko enei tioata ka nui te rereketanga o te kaha o te hopu waikawa karihi. Ko te pähekeheke o te whakarewa waro ka piki i te wa kotahi. I te 30°C, ka piki te nui o te chloroform volatilization e 40% ki te 25°C. I te wa e mahi ana, me whakarite kia 0.5m / s te tere o te hau i roto i te hau, me te whakamahi i nga karapu nitrile hei pupuri i te whai huatanga tiaki.

Ko nga whakamatautau PCR ka pa atu ki nga raruraru pāmahana tino uaua. Ko nga reagents penei i te Taq enzyme me te whakamuri transcriptase he tino tairongo ki nga rereketanga o te pāmahana ohorere. Ko te tohe i runga i nga pakitara ngongo i muri i te tangohanga mai i te pouaka tio -20°C ka nui atu i te 15% te ngaro o te mahi o te enzyme mena ka uru ki te punaha tauhohenga. Ka taea hoki e nga otinga dNTP te whakaatu i te paheketanga ka kitea i muri i te 5 meneti noa o te rongo ki te pāmahana rūma (>30°C). Ko te mahi taputapu ka whakararu hoki i te wera nui. Mena he> 35°C te pāmahana ambient taiwhanga me te kore e ranea te whakamaarama wera o te taputapu PCR (<50 cm mai i te pakitara), ka eke te rereketanga o te pāmahana o roto ki te 0.8°C. Ka taea e tenei rereke te kaha o te kaha o te whakakaha i te taha o te pereti 96-puna ki te heke neke atu i te 40%. Me horoi i nga wa katoa nga whiriwhiringa puehu (ka whakaitihia e te kohinga puehu te kaha o te tohanga wera ma te 50%), me karohia te whakamahana hau tika. I tua atu, i te wa e mahi ana i nga whakamatautau PCR mo te po, karohia te whakamahi i te taputapu PCR hei "whakamaeke hanga" ki te penapena tauira. Ko te rokiroki i te 4°C mo te neke atu i te 2 haora ka puta te condensation i muri i te katinga o te taupoki whakawera, te waimeha i te punaha tauhohenga me te waikura pea i nga waahanga whakarewa o te taputapu.

I mua i nga whakatupato i te pāmahana teitei, me tangi ano nga taiwhanga irapoi i te whakaoho. Ko nga tauira RNA utu nui me penapena ki muri o te pouaka tio -80°C, me te uru ki nga waa wera teitei. Ko te whakatuwhera i te kuaha o te pouaka tio -20°C neke atu i te rima nga wa ia ra ka kaha ake te rerekee o te pāmahana. Ko nga taputapu whakaputa wera nui me 50 cm te iti rawa o te mokowhiti wera i nga taha e rua me nga taha o muri. I tua atu, e taunaki ana kia whakatikatikahia te wa whakamatautau: 7:00-10:00 AM mo nga mahi tairongo-mahana penei i te tangohanga RNA me te uta qPCR; 1:00-4:00 PM mo nga mahi kore-whakamatautau penei i te tātari raraunga. Ka taea e tenei rautaki te aukati i nga tihi teitei-nui kia kore e pokanoa ki nga mahi whakahirahira.

Ko nga whakamatautau ngota i te wa o te ngaru wera he whakamatautau mo te tikanga me te manawanui. I raro i te ra o te raumati, tera pea kua tae ki te wa ki te tuku i to pipette me te taapiri i tetahi pouaka tio ki o tauira kia pai ake te wera o te taputapu. Ko tenei whakaute mo te rerekee o te pāmahana ko te kounga taiwhanga tino utu nui i nga marama o te raumati wera—i te mea katoa, i te wera o te raumati 40°C, tae noa ki nga ngota ngota e hiahia ana kia tiakina marietia he “waahi polar artificial”.