Raparongoā PCR Analyzer: Nga Uiuinga Auau me nga Rongoa

Ko nga Kaitirotiro tauhohenga mekameka polymerase (PCR) he taputapu nui i roto i te koiora ngota, ka taea e nga kairangahau te whakanui i te DNA mo nga tono mai i te rangahau ira tae noa ki nga taatai ​​haumanu. Heoi ano, pera i tetahi taputapu uaua, ka tupono tetahi kaitirotiro PCR ki nga raru e pa ana ki tana mahi. Ka korero tenei tuhinga ki etahi patai noa moKaitātari PCRrapurongoā me te whakarato otinga whaitake ki nga raruraru noa.

1. He aha taku tauhohenga PCR kare e kaha ake?

Ko tetahi o nga raru nui e pa ana ki nga kaiwhakamahi ko te kore e taea e te tauhohenga PCR ki te whakanui i te DNA whaainga. Ka taea tenei ki te maha o nga take:

Ko te hoahoa tuatahi e he ana: Me mohio he mea motuhake o pukapuka tuatahi mo te raupapa whainga me te whai i te pāmahana whakarewa tino pai (Tm). Whakamahia nga taputapu rorohiko mo te hoahoa tuatahi hei karo i te herenga kore motuhake.

He iti rawa te DNA tauira: Manatokona kei te whakamahi koe i te nui o te DNA tauira. He iti rawa ka hua ka ngoikore, karekau ranei te whakakaha.

Ko nga kaitarai i roto i te tauira: Ka taea e nga poke i roto i te tauira te aukati i te tauhohenga PCR. Whakaarohia te pure i to DNA me te whakamahi i tetahi tikanga tangohanga rereke.

Rongoā: Tirohia to hoahoa tuatahi, whakanuia te kukū o te tauira, me te whakarite kia kore he aukati i roto i to tauira.

2. He aha i he te rahi o taku hua PCR?

Mena kaore i rite te rahi o to hua PCR i te mea e tumanakohia ana, ka tohu pea he raru ki nga ahuatanga tauhohenga me nga kai i whakamahia.

Whakanuia kore-motuhake: Ka puta tenei mena ka herea te tuatahi ki tetahi waahi kaore i whakaarohia. Tirohia te motuhake o nga mea tuatahi ma te whakamahi i tetahi taputapu penei i te BLAST.

Te Pamahana Ainea Hehe: Mena he iti rawa te pamahana annealing, ka puta pea he here kore-motuhake. Te arotautanga o te pāmahana whakaene na roto i te rōnaki PCR.

Otinga: Whakapumautia te motuhake tuatahi me te arotau i te pāmahana whakaeneene kia pai ake te tika o nga hua PCR.

3. Ka whakaatuhia e taku kaitirotiro PCR he karere hapa. me aha ahau?

Ko nga karere hapa i runga i te kaitirotiro PCR ka tino whakamataku, engari ka taea e raatau te whakaatu tohu mo nga raru pea.

Nga Take Whakatikatika: Me whakarite kia tika te whakatikatika i te kaitirotiro PCR. He mea nui te tiaki me te whakatikatika i nga wa katoa ki te whiwhi hua tika.

Roopu Pūmanawa: I etahi wa, ka raru pea nga raru rorohiko. Tīmataria anō tō rorohiko ka taki mō ngā whakahōu pūmanawa.

TE WHAKAMAHI: Tirohia te pukapuka a te kaiwhakamahi mo te waehere hapa motuhake me te whai i nga waahanga rapurongoā kua tohua. Ka taea e te tiaki i nga wa katoa te aukati i nga raru maha.

4. He aha te take i kore ai e rite aku hua tauhohenga PCR?

He maha nga take ka raru nga hua PCR rerekee:

Te Kounga Reagent: Me whakarite he hou, he kounga teitei hoki nga reagents katoa, tae atu ki nga enzymes, buffers, me dNTPs. Ko nga reagents kua pau, kua poke ranei, ka rereke pea.

Te Whakatairanga Hukarere Ngaaahu: Ko nga tautuhinga pāmahana koretake ka pa ki te mahi PCR. Tirotiro i nga wa katoa te whakatikatika o te kaieke waiariki.

Rongoa: Whakamahia nga reagents-kounga teitei me te whakatikatika i to kaihuri hiko waiariki i ia wa kia rite tonu nga hua.

5. Me pehea te whakapai ake i te pai o te tauhohenga PCR?

Ko te whakapai ake i te pai o nga tauhohenga PCR ka nui ake nga hua me nga hua pono ake.

Arotau i nga tikanga tauhohenga: Whakamatau ma te whakamahi i nga kuhanga rereke o nga mea tuatahi, tauira DNA me te MgCl2. Ka hiahiatia e ia tauhohenga PCR nga tikanga motuhake mo te mahi tino pai.

Whakamahia nga whākōkī tino pono: Mena he mea nui te tika, whakaarohia te whakamahi i te polymerase DNA pono-nui hei whakaiti i nga hapa i te wa e whakakaha ana.

Rongoā: Mahihia he whakamatautau arotautanga kia kitea nga tikanga pai mo to tatūnga PCR motuhake.

Hei whakarāpopototanga

Raparongoā aKaitātari PCRHe mahi tino uaua, engari ko te mohio ki nga raru noa me o raatau otinga ka tino whakanui ake i to wheako PCR. Ma te whakaoti i enei raruraru noa, ka taea e nga kairangahau te whakapai ake i nga hua PCR me te whakarite i nga hua pono i roto i nga tono koiora rapoi. Ko te tiaki i nga wa katoa, te kowhiringa o nga reagents, me te arotautanga o nga tikanga tauhohenga he mea matua ki te tātari PCR angitu.