Aroturuki PCR Arotake: Nga Pātai Auau me nga Whakataunga

Ko te tātari i te Chain Whakataetae (PCR) nga taputapu nui i roto i te rauropi hauhake, te tuku kairangahau ki te whakanui i te DNA mo nga rangahau a te ira tangata ki nga mahi a te ira tangata. Heoi, ano he taputapu uaua, ka taea e te kaitātari PCR te raru nga raru e pa ana ki ana mahi. Ko tenei tuhinga e korero ana i etahi patai noa moKaitātari PCRte raru me te whakarato rongoa pono ki nga raru noa.

1

Ko tetahi o nga raru e pa ana ki nga kaiwhakamahi ko te ngoikore o te tauhohenga PCR ki te whakanui i te DNA whaainga. Ka taea tenei te tohu ki nga mea maha:

Ko te hoahoa tuatahi he: Me whakarite he motuhake o to kaupapa mo te raupapa whaainga me te whai i te pāmahana tino pai (TM). Whakamahia nga taputapu raupaparorohiko mo te hoahoa tuatahi hei karo i te here o te hau.

Kaore i te rahi te tauira DNA: Tirohia ko te whakamahi i te nui o te tauira DNA. He iti rawa te mea ka puta i te ngoikore, kaore ranei i te whakanui.

Whakakorea i roto i te tauira: Ko nga poke o te tauira ka taea te aukati i te tauhohenga PCR. Whakaarohia te horoi i to DNA, ki te whakamahi ranei i tetahi tikanga tangohanga rereke.

Rongoā: Tirohia to hoahoa tuatahi, whakapiki i te kukume tauira, me te whakarite kia kore e nga kaimahu i to tauira.

2. He aha te take o taku hua PCR?

Mena kaore i te whakaarohia te rahi o te hua o to hua PCR, ka tohu pea i te raru o nga ahuatanga o te tauhohenga, i nga kai ranei e whakamahia ana.

Whakaurutanga kore-motuhake: Ka taea e tenei te puta mena ka herea te kaimara ki tetahi papa kaore i mohiotia. Tirohia te motuhake o nga mea tuatahi ma te whakamahi i tetahi taputapu penei i te pupuhi.

Te pāmahana ā-tinana he: Mena he iti rawa te pāmahana nui, ko te here kore-aunoa. Te arotautanga o te pāmahana Anneing na te PCR Gradient.

Rongoā: Whakaūtia te motuhake o te tuatahi me te arotau i te pāmahana ā-tau hei whakapai ake i te tika o nga hua pcr.

3. E whakaatu ana taku kaitātari PCR i tetahi karere hapa. Me aha ahau?

Ko nga karere hapa i runga i te kaitātari PCR ka taea te ohorere, engari ka taea e raatau te tuku tohu ki nga raru pea.

Kia tika te whakamana i te kaitātari PCR. Ko te arowhai me te tirotiro i nga wa katoa he mea nui ki te whiwhi hua tika.

Rōpū Pūmanawa: I etahi wa, ka raru nga pepeke raupaparorohiko. Tīmataria anō tō rorohiko me te tirotiro mō ngā whakahōunga pūmanawa.

Rongoā: Tirohia ki te pukapuka kaiwhakamahi mo te waehere hapa motuhake me te whai i nga waahanga raru e taunakitia ana. Ka taea e te tiaki tonu te aukati i nga raru maha.

4. He aha te take o taku urupare PCRA?

Ko nga hua o te PCR he rite ki te ngahau mo nga take maha:

Te kounga reagent: Me whakarite kia uru katoa nga rehitatanga, tae atu ki nga whaanui, ko nga peeke, me te DNTP hou, he kounga teitei hoki. Ko nga reagents kua pau, kua pangia ranei e te rereketanga.

Ko te kohinga Thermal Cycler: Ka pa mai nga ahuatanga o te pāmahana ki te tukanga PCR. Tirohia te wa i te wa o te huringa waiariki.

Rongoā: Whakamahia nga rea ​​tohu kounga nui me te whakariterite i to huringa waiariki i nga wa katoa kia pai ai nga hua.

5. Me pehea te whakapai ake i te kaha o te PCR?

Ko te whakapai ake i te kaha o te urupare PCR ka taea e nga hua teitei ake me nga hua tino kaha.

Whakakorehia nga tikanga urupare: Whakamatau Ma te whakamahi i nga kohinga rereke o te tuatahi, Tātauira DNA me MGCL2. Ko ia tauhohenga PCR e hiahia ana kia noho motuhake mo te mahi tino pai.

Whakamahia nga tohu pono-pono: Mena he mea nui te tika, me whai whakaaro ki te whakamahi i te polymerate DNA tino rongonui ki te whakaiti i nga hapa i te wa i te whakanui.

Rongoā: Mahi i tetahi whakamatautau arotau kia kitea ai nga tikanga pai mo to tautuhi PCR motuhake.

Hei whakarāpopototanga

Te raru i teKaitātari PCRKa taea e koe te mahi i te mahi whakamataku, engari ko te maarama ki nga raru o te nuinga me te whakarei ake i o wheako PCR. Ma te whakatika i enei raru noa, ka taea e nga kairangahau te whakapai ake i nga hua o te PCR me te whakarite i nga hua pono i roto i nga tono koiora koiora. Ko te tiaki i nga wa katoa, ko te kowhiringa o nga reagent, me te arotautanga o nga tikanga tauhohenga he taviri ki te tātari PCR angitu.